NVP-ADW742

NVP-ADW742 exhibits a 6-fold greater selectivity for IGF-1R versus InsR with IC50 of 2.8 μM; minimal inhibitory activity against c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2, or Bcr-Abl p210 with IC50 greater than 5 μM. This compound significantly inhibits the serum-stimulated cell proliferation in a variety of tumor cell lines in dose-dependent manner, with IC50 values of 0.1-0.5 μM for the multiple myeloma (MM) cell lines, and the antitumor effects on MM cells can not be overcome by the co-culture with BMSCs. It also abrogates the responsiveness of tumor cells to IL-6 in the presence of serum. In addition, this chemical is active against MM cell lines with resistance to conventional (cytotoxic chemotherapy) or investigational (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341) anticancer agents, as well as primary tumor cells from MM patients with multi-drug-resistant disease. This compound decreases the production of VEGF by tumor cells and bone marrow stromal cells, and suppresses the IGF-1-induced secretion of VEGF by various tumor types such as thyroid cancer cells or MM cells. IGF-1R inhibition by this compound (0.75 μM) sensitizes MM cells or prostate cancer cells to other anticancer agents such as doxorubicin, TRAIL/Apo2L, or PS-341. [1]

Administration of NVP-ADW742 at 10 mg/kg twice daily significantly inhibits tumor growth, prolongs survival, and enhances the antitumor effect of cytotoxic chemotherapy in the mice model of diffuse MM. [1]

• Cellulär kinasaktivitetsanalys

  IC50-värdet för effekten av NVP-ADW742 på autofosforyleringen av IGF-1R bestäms på cellulär nivå i närvaro av ökande koncentrationer av denna förening, med 96-brunns "Capture ELISAs"-analyser. Kortfattat sås NWT-21-celler i 96-brunns vävnadsodlingsplattor i komplett tillväxtmedium och odlas till 70-80% konfluens, och svältes sedan i 24 timmar i 0,5% FCS-medium. Därefter inkuberas cellerna i 90 minuter i närvaro av denna hämmare följt av stimulering med IGF-I (10 ng/mL) i 10 minuter vid 37 °C. Därefter tvättas cellerna två gånger med iskallt PBS och lyseras vid 4 °C med 50 μL/brunn RIPA-buffert (50 mM Tris-HCl, pH 7,2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidin, 15 mM natriumpyrofosfat, 1 mM PMSF och 0,5 mM Na₃VO₄). Lysaten från varje experiment överförs sedan till svarta ELISA-plattor förbelagda med fångstantikroppar specifika för IGF-1R. Efter fångst av antikropparna blandas lysaten med 40 μL av en alkalisk fosfatas (AP) märkt anti-fosfotyrosin-antikropp (PY20(AP) utspädd till 0,2 μg/mL i RIPA-buffert och inkuberas över natten vid 4 °C. Efter tvättning (PBST) och inkubation i 45 minuter vid RT med det luminescerande AP-substratet CDPStar RTU med Emerald II (90 μL/brunn), mäts luminescensen med en Packard Top Count Scintillation Counter.

• Cellinjer

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• Koncentrationer

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• Inkubationstid

  48 hours

• Metod

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• Djurmodeller

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• Doseringar

  10 mg/kg twice daily

• Administrering

  Injection i.p. or oral gavage