Home Cell Cycle CDK Hämmare PHA-793887

endast för forskning

PHA-793887 CDK Hämmare

Kat.nr.: S1487

PHA-793887 är en ny och potent hämmare av CDK2, CDK5 och CDK7 med IC50 på 8 nM, 5 nM respektive 10 nM. Den är mer än 6 gånger mer selektiv för CDK2, 5 och 7 än för CDK1, 4 och 9. Denna förening inducerar cell-cycle-arrest och apoptos. Fas 1.
PHA-793887 CDK Hämmare Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 361.48

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: S148701 DMSO]72 mg/mL]false]Ethanol]72 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Renhet: 99.64%
  • Citerad i Nature Medicine för sin förstklassiga kvalitet
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datablad
99.64

Cellodling, behandling & arbetskoncentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellinjer Analystyp Koncentration Inkubationstid Formulering Aktivitetsbeskrivning PMID
human A2780 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human A2780 cells after 72 hrs by fluorescence assay, IC50=0.09 μM
human HCT116 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.163 μM
human COLO205 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human COLO205 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.188 μM
human C-433 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human C-433 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.285 μM
human DU145 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human DU145 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.303 μM
human A375 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human A375 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.396 μM
human PC3 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human PC3 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=0.601 μM
human MCF7 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human MCF7 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=1.284 μM
human BxPC3 cells Proliferation assay 72 h Antiproliferative activity against human BxPC3 cells after 72 hrs by SRB assay, IC50=3.444 μM
human A2780 cells Function assay 3 μM Inhibition of CDK in human A2780 cells assessed as accumulation of hypophosphorylated form of retinoblastoma protein at 3 uM by immunohistochemistry
Klicka för att visa mer experimentella data för cellinjer

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt 361.48 Formel

C19H31N5O2

 Lagring (från mottagningsdatumet)
CAS-nr 718630-59-2 Ladda ner SDF Lagring av stamlösningar

Synonymer N/A Smiles CC(C)CC(=O)NC1=NNC2=C1CN(C2(C)C)C(=O)C3CCN(CC3)C

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 72 mg/mL (199.18 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Ethanol : 72 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa Koncentration Volym Molekylvikt
Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo
Batch:

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

mg/kg g μL

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH2O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Egenskaper
Multi-CDK inhibitor.
Targets/IC50/Ki
CDK5/p25
(Cell-free assay)
5 nM
CDK2/CyclinA
(Cell-free assay)
8 nM
CDK2/CyclinE
(Cell-free assay)
8 nM
CDK7/CyclinH
(Cell-free assay)
10 nM
CDK1/CyclinB
(Cell-free assay)
60 nM
CDK4/CyclinD1
(Cell-free assay)
62 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
79 nM
CDK9/CyclinT1
(Cell-free assay)
138 nM
In vitro
PHA-793887 has low activity against CDK1, CDK4, CDK9 and GSK3β with IC50 of 60 nM, 62 nM, 138 nM and 79 nM, respectively. This compound inhibits cell proliferation of many tumor cell lines, including A2780, HCT-116, COLO-205, C-433, DU-145, A375, PC3, MCF-7, and BX-PC3, with IC50 of 88 nM–3.4 μM. It (1 μM) shows a decrease in the S phase, a subsequent increase of the G1 phase and a slight accumulation of G2/M phase in A2780 cells. This chemical (3 μM) significantly increases G2/M phase and reduces DNA synthsis. It is cytotoxic for leukemic cell lines, including K562, KU812, KCL22, and TOM1, with IC50 of 0.3–7 μM, but it is not cytotoxic for normal unstimulated peripheral blood mononuclear cells or CD34+ hematopoietic stem cells. In colony assays, this compound shows very high activity against leukemia cell lines with IC50 less than 0.1 μM. It induces cell-cycle arrest, inhibits Rb and nucleophosmin phosphorylation, and modulates cyclin E and cdc6 expression at 0.2−1 μM and induces apoptosis at 5 μM.
Kinasanalys
CDK-kinastest
Föreningarnas biokemiska aktivitet bestäms genom inkubation med specifika enzymer och substrat, följt av kvantifiering av den fosforylerade produkten. PHA-793887 (1,5 nM–10 μM) inkuberas i 30–90 minuter vid rumstemperatur i närvaro av ATP/33P-γ-ATP-mix, substrat och det specifika enzymet (0,7–100 nM) i en slutvolym på 30 μL kinasbuffert, med användning av 96 U bottenplattor. Efter inkubation stoppas reaktionen och det fosforylerade substratet separeras från icke-inkorporerat radioaktivt ATP med hjälp av SPA-pärlor, Dowex-harts eller Multiscreen-fosfocellulosafilter enligt följande: (1) För SPA-analyser. Reaktionen stoppas genom tillsats av 100 μL PBS + 32 mM EDTA + 0,1 % Triton X-100 + 500 μM ATP, innehållande 1 mg streptavidinbelagda SPA-pärlor. Efter 20 minuters inkubation för substratfångst överförs 100 μL av reaktionsblandningen till Optiplate 96-brunnsplattor innehållande 100 μL 5 M CsCl, får stå i 4 timmar för att låta pärlorna stratifiera till toppen av plattan och räknas med TopCount för att mäta substratinkorporerat fosfat. (2) För Dowex-hartsanalys. En mängd av 150 μL harts/format, pH 3,00, tillsätts för att stoppa reaktionen och fånga upp oreatat 33P-γ-ATP, och separerar det från det fosforylerade substratet i lösning. Efter 60 minuters vila överförs 50 μL supernatant till Optiplate 96-brunnsplattor. Efter tillsats av 150 μL Microscint 40 räknas radioaktiviteten i TopCount. (3) För Multiscreen-analys. Reaktionen stoppas med tillsats av 10 μL EDTA (150 mM). En mängd av 100 μL överförs till en MultiScreen-platta för att tillåta substratbindning till fosfocellulosafiltret. Plattorna tvättas sedan tre gånger med 100 μL H2PO4 (75 mM) filtrerad av ett MultiScreen-filtreringssystem och torkas. Efter tillsats av 100 μL Microscint 0 räknas radioaktiviteten i TopCount. IC50-värden erhålls genom icke-linjär regressionsanalys.
In vivo
PHA-793887 (10–30 mg/kg) shows good efficacy in the human ovarian A2780, colon HCT-116, and pancreatic BX-PC3 carcinoma xenograft models. This compound (20 mg/kg) is effective in xenograft models of K562 and HL60 cells, primary leukemic disseminated model, and a high-burden disseminated ALL-2 model derived from a relapsed Philadelphia-positive acute lymphoid leukemia patient.
Referenser