Home PI3K/Akt/mTOR AMPK Hämmare Dorsomorphin Dihydrochloride

endast för forskning

Dorsomorphin Dihydrochloride AMPK/BMP Pathway-hämmare

Kat.nr.: S7306

Dorsomorphin 2HCl är en potent, reversibel, selektiv AMPK-hämmare med Ki på 109 nM i cellfria analyser, som inte uppvisar någon signifikant hämning av flera strukturellt relaterade kinaser inklusive ZAPK, SYK, PKCθ, PKA och JAK3. Hämmar även typ Ⅰ BMP-receptor-aktivitet. Dorsomorphin inducerar autophagy i cancercellinjer.
Dorsomorphin Dihydrochloride AMPK Hämmare Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 472.41

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: Renhet: 99.98%
99.98

Cellodling, behandling & arbetskoncentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellinjer Analystyp Koncentration Inkubationstid Formulering Aktivitetsbeskrivning PMID
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP4-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
C2C12 Function assay 4 uM Inhibition of BMPR1-mediated osteoblast differentiation in BMP6-stimulated mouse C2C12 cells assessed as decrease in alkaline phosphatase level at 4 uM by spectrophotometry 18026094
HepG2 Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in BMP2-stimulated human HepG2 cells at 10 uM treated 30 mins before BMP2 challenge measured after 16 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated hepcidin mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
Hep3B Function assay 10 uM 30 mins Inhibition of BMPR1-mediated Id1 mRNA expression in IL6-stimulated human Hep3B cells at 10 uM treated 30 mins before IL6 challenge measured after 6 hrs by qRT-PCR analysis 18026094
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
Rh30 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh30 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
KB-3-1 qHTS assay P-glycoprotein substrates identified in KB-3-1 adenocarcinoma cell line, qHTS therapeutic library screen 31515284
Klicka för att visa mer experimentella data för cellinjer

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt 472.41 Formel

C24H25N5O.2HCl

 Lagring (från mottagningsdatumet)
CAS-nr 1219168-18-9 Ladda ner SDF Lagring av stamlösningar

Synonymer BML-275 2HCl,Compound C 2HCl Smiles C1CCN(CC1)CCOC2=CC=C(C=C2)C3=CN4C(=C(C=N4)C5=CC=NC=C5)N=C3.Cl.Cl

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

Water : 47 mg/mL

DMSO : Insoluble
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa Koncentration Volym Molekylvikt
Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo
Batch:

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

mg/kg g μL

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH2O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ALK2
ALK3
ALK6
AMPK
(Cell-free assay)
109 nM(Ki)
In vitro

Dorsomorphin inhibits ACC inactivation by AICAR, and also attenuates AICAR’s effect to increase fatty acid oxidation or suppress lipogenic genes in hepatocytes.

Inhibition of AMPK activity by Dorsomorphin almost completely inhibits autophagic proteolysis in HT-29 cells.

In addition, Dorsomorphin selectively inhibits the BMP type I receptors ALK2, ALK3 and ALK6, and thus blocks BMP-mediated SMAD1/5/8 phosphorylation, target gene transcription and osteogenic differentiation.

Kinasanalys
Partiell rening av AMPK och in vitro-kinasanalys.
Lever-AMPK renas delvis från hanliga SD-råttor upp till blue-Sepharose-steget. Reaktionsblandningen på 100 μl innehåller 100 μM AMP, 100 μM ATP (0,5 μCi 33P-ATP per reaktion) och 50 μM SAMS i en buffert (40 mM HEPES, pH 7,0, 80 mM NaCl, 0,8 mM EDTA, 5 mM MgCl2, 0,025% BSA och 0,8 mM DTT). Reaktionen initieras genom tillsats av enzymet. Efter 30 minuters inkubering vid 30°C avbryts reaktionen genom tillsats av 80 μl 1% H3PO4. Alikvoter (100 μl) överförs till 96-brunnars MultiScreen-plattor. Plattan tvättas tre gånger med 1% H3PO4 följt av detektion i en Top-count. In vitro AMPK-inhiberingsdata erhållna med Dorsomorphin Dihydrochloride — (6-[4-(2-Piperidin-1-yl-ethoxy)-phenyl)]-3-pyridin-4-yl-pyyrazolo[1,5-a] pyrimidine — anpassas till följande ekvation för kompetitiv inhibering genom icke-linjär regression med en minsta-kvadrat-Marquardt-algoritm i ett datorprogram skrivet av N. Thornberry från Merck Research Laboratories: Vi/Vo = (Km + S)/[S + Km × (1 + I/Ki)], där Vi är den inhiberade hastigheten, Vo är den initiala hastigheten, S är substratkoncentrationen (ATP), Km är Michaelis-konstanten för ATP, I är inhibitor-koncentrationen (Dorsomorphin Dihydrochloride) och Ki är dissociationskonstanten för Dorsomorphin Dihydrochloride.
In vivo

Dorsomorphin (10 mg/kg) reduces basal levels of hepcidin expression and increases serum iron concentrations in adult mice.

Dorsomorphin (0.2 mg/kg, i.v.) significantly reduces VCAM-1 and ICAM-1 expression in the thoracic aorta of LPS-treated rats.

Referenser
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21764059/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35241643/

Applikationer (Applications)

Metoder Biomarkörer Bilder PMID
Western blot p-SMAD / SMAD Id1 / Id2 / Id3 pAMPK / AMPK / pACC / ACC / pRaptor / HIF1α p-ERK / ERK / Bcl2 / BAX / Cleaved caspase-3 LC3B I/ LC3B II
S7306-WB1
30808965
Immunofluorescence MyHC Id1 / MyoD
S7306-IF1
20689554
Growth inhibition assay Cell viability (MM cells) Cell viability (glioma cell lines)
S7306-viability1
25010525

Vanliga frågor (Frequently Asked Questions)

Fråga 1:
Is there any information you may provide as to WHICH AMPK SUBUNIT this compound is targeting in the AMPK complex?

Svar:
According to the reference (see link below), it should target the AMPK alpha subunit through ALCAR or metformin. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20844250