Home DNA Damage/DNA Repair PPAR Antagonist GW9662

endast för forskning

GW9662 PPARγ-antagonist

Kat.nr.: S2915

GW9662 är en selektiv PPAR-antagonist för PPARγ med IC50 på 3,3 nM i en cellfri analys, med minst 10- till 600-faldig funktionell selektivitet i celler med PPARγ jämfört med PPARα och PPARδ.
GW9662 PPAR Antagonist Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 276.68

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: Renhet: 99.94%
99.94

Cellodling, behandling & arbetskoncentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellinjer Analystyp Koncentration Inkubationstid Formulering Aktivitetsbeskrivning PMID
293H Function assay 30 mins Antagonist activity at human PPARgamma expressed in 293H cells assessed as reduction in transcriptional response preincubated for 30 mins followed by addition and measured after 16 hrs by reporter gene-based FRET assay, EC50=0.002μM 31294974
Klicka för att visa mer experimentella data för cellinjer

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt 276.68 Formel

C13H9ClN2O3

 Lagring (från mottagningsdatumet)
CAS-nr 22978-25-2 Ladda ner SDF Lagring av stamlösningar

Synonymer N/A Smiles C1=CC=C(C=C1)NC(=O)C2=C(C=CC(=C2)[N+](=O)[O-])Cl

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 55 mg/mL (198.78 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa Koncentration Volym Molekylvikt
Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo
Batch:

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

mg/kg g μL

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH2O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PPARγ
(Cell-free assay)
3.3 nM
PPARα
(Cell-free assay)
32 nM
In vitro

GW9662 binds to Cys(285) on PPARgamma which is conserved among all three PPARs. This compound acts as an antagonist of PPARgamma which is confirmed in an assay of adipocyte differentiation inhibition. It prevents activation of PPARγ and inhibits growth of human mammary tumour cell lines (MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231) with IC50 of 20 μM-30 μM, suggesting either the existence of PPARγ agonistic properties of this chemical or growth-inhibitory mechanisms independent of PPARγ. Co-treatment with this compound (10 μM) results in statistically lower viable cell numbers after 7 days in MDA-MB-231 cells. PPARγ1 ligands could suppress RANKL-induced osteoclast formation in primary murine myeloid (BMs) and RAW264.7 cells. Importantly, suppression by these ligands is reversed in a concentration-dependent fashion with this chemical (2 μM). It (2 μM) blocks IL-4 suppression of osteoclast formation in BMs. This compound (1 μM) blocks RANKL activation of NF-κB in RAW264.7 cells. GW9662 (10 μM) inhibits hormone- and agonist-induced adipogenesis of primary preadipocytes from patients with thyroid eye disease.

Kinasanalys
Bindningsanalys
De humana PPARα-, PPARγ- och PPARδ-ligandbindningsdomänerna (LBD) uttrycks i E. coli som polyhistidin-märkta fusionsproteiner. Receptorer immobiliseras på SPA-kulor genom tillsats av önskad receptor (15 nM) till en slurry av streptavidin-modifierade SPA-kulor (0,5 mg/mL) i analysbuffert. Blandningen får jämvikta i minst 1 timme vid rumstemperatur, och kulorna pelleteras genom centrifugering vid 1×103 g. Supernatanten kasseras, och kulorna resuspenderas i den ursprungliga volymen av färsk analysbuffert med skonsam blandning. Centrifugeringen/resuspensionen upprepas, och den resulterande slurryn av receptorbelagda kulor används omedelbart eller förvaras vid 4 ℃ i upp till 1 vecka före användning. [3H]GW2443 används som radioligander för bestämning av kompetitiv bindning till PPARα, PPARγ respektive PPARδ. Om inte annat anges är bufferten som används för alla analyser 50 mM HEPES (pH 7), 50 mM NaCl, 5 mM CHAPS, 0,1 mg/mL BSA och 10 mM DTT. För vissa experiment ersätts HEPES (pH 7) med 50 mM Tris (pH 8).
In vivo

Pretreatment with LPS (1 mg/kg i.p.) significantly attenuates all markers of renal injury and dysfunction caused by ischemia/reperfusion (I/R) injury in rats. Most notably, this compound (1 mg/kg i.p.) abolishes the protective effects of LPS.

Referenser
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12519830/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16014029/

Applikationer (Applications)

Metoder Biomarkörer Bilder PMID
Western blot Vimentin / Slug / MMP9 / MMP2
S2915-WB1
30912275
Growth inhibition assay Cell proliferation
S2915-viability1
30912275