Name: Nirogacestat (PF-03084014)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8018
Rating: 5 (21 reviews)

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: Renhet: 99.31%

99.31

Relaterade mål	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease Tyrosinase HIV Protease DPP Serine Protease
Övrigt Secretase Inhibitorer	DAPT RO4929097 (RG-4733) LY411575 Dibenzazepine (YO-01027) MK-0752 Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt	489.64	Formel	C₂₇H₄₁F₂N₅O	Lagring (från mottagningsdatumet)	3 år-20°Cpulver
CAS-nr	1290543-63-3	Ladda ner SDF		Lagring av stamlösningar	1 år-80°Ci lösningsmedel 1 månad-20°Ci lösningsmedel
Synonymer	PF-3084014			Smiles	CCCC(C(=O)NC1=CN(C=N1)C(C)(C)CNCC(C)(C)C)NC2CCC3=C(C2)C(=CC(=C3)F)F

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (200.14 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Ethanol : 49 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa	Koncentration	Volym	Molekylvikt
=	×	×

Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validerad av Selleck-laboratorier. Om du behöver justeringar av denna formulering, kontakta vårt säljteam för skräddarsydd testning.	2.400mg/ml (4.90mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

Dosering: mg/kg Djurens medelvikt: g Doseringsvolym per djur:μL Antal djur:

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH₂O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	gamma-secretase (cell-free assay) 6.2 nM
In vitro	Nirogacestat (PF-03084014) inhibits Notch receptor cleavage in cellular assays using HPB-ALL cells that harbor mutations in both the heterodimerization and PEST domains in Notch1 with IC50 of 13.3 nM. It downregulates Notch target genes Hes-1 and cMyc expression in HPB-ALL cells with IC50 of <1 nM and 10 nM, respectively, and inhibits cell growth of a subset of human T-ALL cell lines (HPB-ALL, DND-41, TALL-1, and Sup-T1) through induction of cell cycle arrest and apoptosis with IC50s of 30–100 nM. This compound reduces proliferation of HUVECs with IC50 of 0.5 μM, and decreases the lumen formation with an IC50 value of 50 nM. It (1 μM) has no antiproliferative effect in MX1 cells; however, it inhibits migration by 95%.
Kinasanalys	γ-secretase-analys
Kinasanalys	Ett DNA-fragment som kodar för aminosyrorna 596 - 695 av 695-aa-isoformen av APP (APP695) och Flag-sekvensen (DYKDDDDK) vid C-terminalen genereras genom PCR-amplifiering med lämpligt utformade oligonukleotider och APP695 cDNA. Met som fungerar som translationsstartplats är rest 596 av APP695 (P1-resten med avseende på β-secretase-klyvningsplatsen). Detta DNA-fragment infogas i den prokaryota expressionsvektorn pET2-21b. Det rekombinanta proteinet, C100Flag, överproduceras i Escherichia coli [stam BL21(DE3)] och renas genom Mono-Q-kolonnkromatografi. C100Flag (1,7 μM) inkuberas med cellmembran (0,5 mg/mL) i närvaro av CHAPSO, CHAPS (3-[(3-kolamidopropyl)dim-etylammonio]-1-propansulfonat) eller Triton X-100 (0, 0,125, 0,25, 0,5 eller 1 %) i buffert B (50 mM Pipes, pH 7,0, 5mM MgCl₂/5 mM CaCl₂/150 mM KCl) vid 37 °C. Reaktionerna stoppas genom tillsats av RIPA (150 mM NaCl/1,0 % NP-40/0,5 % natriumdeoxikolat, 0,1 % SDS/50 mM Tris HCl, pH 8,0) och kokning i 5 min. Proverna centrifugeras och supernatanten analyseras för Aβ-peptiderna med ECL. De Aβ40- och Aβ42-relaterade produkterna från γ-secretase-medierad bearbetning av C100Flag har ett Met vid N-terminalen och definieras därmed som M-Aβ40 respektive M-Aβ42. På samma sätt inkuberas supernatantlösning (0,125 mg/mL) från CHAPSO-extraherade HeLa-cellmembran (löslig γ-secretase) med C100Flag (1,7 μM) i buffert B innehållande 0,25 % CHAPSO och analyseras därefter för M-Aβ40 och M-Aβ42 med ECL. Denna förening, Nirogacestat (PF-03084014), används i det experimentella sammanhanget.
In vivo	Nirogacestat (PF-03084014) orally administrated in a single dose of 200 mg/kg causes maximal NICD inhibition for ∼80% in xenograft HPB-ALL tumors. It shows robust antitumor activity in this mode with a maximal tumor growth inhibition of ∼92% at a dose of 150 mg/kg, accompanied by a significant reduction of NICD/Notch1, tumor mitotic index (Ki67), and apoptosis (activated caspase-3) staining. At 120 mg/kg, this compound induces apoptosis, antiproliferation, reduces tumor cell self-renewal ability, impairs tumor vasculature, and decreases metastasis activity in breast cancer HCC1599 tumor-bearing mice. Its treatment displays significant antitumor activity in various types of the breast xenograft models with TGI value of at least 50%.
Referenser	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20530712/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22806875/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10801983/

Applikationer (Applications)

Metoder	Biomarkörer	Bilder	PMID
Western blot	N1ICD / Hes-1 / Hey-1 / p-MEK / MEK / c-PARP		23402814

Klinisk prövningsinformation (Clinical Trial Information)

(data från https://clinicaltrials.gov, uppdaterad den 2024-05-22)

NCT-nummer	Rekrytering	Tillstånd	Sponsor/Samarbetspartners	Startdatum	Faser
NCT02338531	Withdrawn	Breast Cancer	Jules Bordet Institute	June 2015	Phase 2
NCT02299635	Terminated	Triple Negative Breast Neoplasms	Pfizer	February 3 2015	Phase 2
NCT02109445	Terminated	Metastatic Cancer Pancreas	Pfizer\|Academic GI Cancer Consortium (AGICC)	September 3 2014	Phase 2
NCT01876251	Terminated	Breast Cancer Metastatic	Pfizer	November 4 2013	Phase 1

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Nirogacestat (PF-03084014) γ-Secretase-hämmare

Molekylvikt: 489.64