Home Cell Cycle Chk Hämmare PF-477736

endast för forskning

PF-477736 Chk Hämmare

Kat.nr.: S2904

PF-477736 (PF-736, PF-00477736) är en selektiv, potent och ATP-kompetitiv Chk1-hämmare med Ki på 0,49 nM i en cellfri analys och hämmar även VEGFR2, Aurora-A, FGFR3, Flt3, Fms (CSF1R), Ret och Yes. Den visar ~100-faldig selektivitet för Chk1 jämfört med Chk2.
PF-477736 Chk Hämmare Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 419.48

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: Renhet: 99.80%
99.80

Cellodling, behandling & arbetskoncentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellinjer Analystyp Koncentration Inkubationstid Formulering Aktivitetsbeskrivning PMID
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Klicka för att visa mer experimentella data för cellinjer

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt 419.48 Formel

C22H25N7O2

 Lagring (från mottagningsdatumet)
CAS-nr 952021-60-2 Ladda ner SDF Lagring av stamlösningar

Synonymer PF-736, PF-00477736 Smiles CN1C=C(C=N1)C2=C3C=NNC(=O)C4=C3C(=CC(=C4)NC(=O)C(C5CCCCC5)N)N2

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 84 mg/mL (200.24 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa Koncentration Volym Molekylvikt
Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo
Batch:

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

mg/kg g μL

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH2O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
0.49 nM(Ki)
VEGFR2
(Cell-free assay)
8 nM(Ki)
Fms
(Cell-free assay)
10 nM(Ki)
YES
(Cell-free assay)
14 nM(Ki)
Chk2
(Cell-free assay)
47 nM(Ki)
In vitro

PF-477736 (128 nM) abrogates the camptothecin-induced DNA damage checkpoint in a dose-dependent manner in CA46 and HeLa cells. This compound effectively abrogates the -induced S-phase arrest with a corresponding increase in apoptotic cell populations in HT29 cells. This chemical (540 nM) enhances -induced cytotoxicity in a time- and dose-dependent manner in HT29 cells. It potentiates the growth-inhibitory activity of a panel of chemotherapeutic agents across a broad spectrum of p53-deficient human cancer cell lines in the MTT assay. Addition of this compound (360 nM) to -arrested cells induces a dramatic increase in the intensity of H2AX phosphorylation, reflecting a greater number of γ-H2AX molecules near sites of DNA damage. This chemical (0.5 nM) selectively blocks p73 and P53 phosphorylation in presence of curcumin in HL-60 cells. It (360 nM) suppresses -induced phosphorylation of histone H3 (Ser10) and Cdc25C (Ser216) and potentiates apoptosis in COLO205 cells. This compound (250 nM) combined with MK-1775 has marked synergistic cytotoxic activity in OVCAR-5 cells. It (250 nM) combined with MK-1775 causes accumulation of cells with a DNA content between 2N and 4N in OVCAR-5 cells. This chemical (250 nM) combined with MK-1775 causes premature mitosis before the end of DNA replication, with damaged DNA leading to apoptotic cell death in OVCAR-5 cells.

Kinasanalys
Bindningsanalys
Analysen utförs i en 96-brunnsplatta under 20 minuter vid 30℃ i 0,1 ml analysbuffert innehållande 50 mM TRIS pH 7,5, 0,4 M NaCl, 4 mM PEP, 0,15 mM NADH, 28 enheter laktatdehydrogenas/ml, 16 enheter pyruvatkinas/ml, 3 mM DTT, 0,125 mM Syntide-2, 0,15 mM ATP och 25 mM magnesiumklorid. Analyserna initieras med 1 nM CHK1-kinasdomän. Hämningen av CHK1-aktivitet bestäms genom att mäta initiala hastigheter i närvaro av varierande koncentrationer av denna förening. Data analyseras med Enzyme Kinetic- och Excel-programvara och anpassas till en kinetisk modell för kompetitiv hämning för att erhålla ett Ki-värde. Kinasselektiviteten för denna kemikalie utvärderas genom att screena den vid 1 μM eller 10 μM mot en panel av cirka 100 proteinkinaser.
In vivo

PF-477736 (4 mg/kg i.v.) results in terminal half-life (T1/2) of 2.9 hours, AUC of 5.72 μg×hr/mL and CLp of 11.8 mL/min/kg in rats. This compound dose-dependently enhances the antitumor activity of a maximum tolerated dose in the Colo205 xenograft mouse model. This chemical (12 mg/kg) induces an increase in the phosphorylation of histone H3 (Ser10) and of phospho-histone H2AX in the Colo205 xenograft mouse model. This compound (15 mg/kg i.p.) enhances induced tumor growth inhibition and tumor growth delay in COLO205 and MDA-MB-231 xenograft models. This chemical (10 mg/kg once daily i.p.) combined with MK-1775 (30 mg/kg twice a day oral) leads to greater tumor growth inhibition in mice bearing OVCAR-5 xenografts.

Referenser
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22713237/

Applikationer (Applications)

Metoder Biomarkörer Bilder PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S2904-viability1
29167438
Western blot p-ATM / γ-H2AX p-53 / p-p53 / p21 / MDM2
S2904-WB2
31362335
Immunofluorescence p-p53
S2904-IF1
31362335

Klinisk prövningsinformation (Clinical Trial Information)

(data från https://clinicaltrials.gov, uppdaterad den 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrytering Tillstånd Sponsor/Samarbetspartners Startdatum Faser
NCT00437203 Terminated
Neoplasms
Pfizer
 December 2006 Phase 1

Vanliga frågor (Frequently Asked Questions)

Fråga 1:
Can you advise the vehicle suggested for S2904: 2% DMSO/40% PEG 300 at 5mg/ml, is it a suspension or clear solution? I wanted to know how to dissolve it for an i.p. injection in mice.

Svar:
It can dissolve in 2% DMSO/40% PEG 300 at 5mg/ml as a clear solution. If you are going to use this kind of vehicle, please dissolve this compound in DMSO clearly first, then add PEG300, then water.