endast för forskning

Purmorphamine Smoothened Receptor Agonist

Name: Purmorphamine
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S3042
Rating: 5 (61 reviews)

Kat.nr.: S3042

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI), som direkt binder till och aktiverar Smoothened, blockerar BODIPY-cyklopaminbindning till Smo med IC50 på ~ 1,5 μM i HEK293T-celler och är även en inducerare av osteoblastdifferentiering med EC50 på 1 μM. Purmorphamine kan minska både basal och inducerad autophagy.

Purmorphamine Hedgehog/Smoothened Agonist Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 520.62

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: Renhet: 99.97%

99.97

Relaterade mål	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Övrigt Hedgehog/Smoothened Inhibitorer	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT 61 (NSC 136476) SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D PF-5274857

Cellodling, behandling & arbetskoncentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellinjer	Analystyp	Koncentration	Inkubationstid	Aktivitetsbeskrivning	PMID
C3H10T1/2	Function assay		6 days	Activity at Smo in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of cell differentiation into osteoblast incubated for 6 days by alkaline phosphatase assay, EC50 = 0.8 μM.	27429255
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells after 30 hrs by luciferase reporter gene assay, EC50 = 1 μM.	16408088
C3H10T1/2	Function assay			Induction of osteogenesis in mouse C3H10T1/2 cells assessed as induction of osteoblast specific marker alkaline phosphatase by immunofluorescence method, EC50 = 1 μM.	16408003
HEK293T	Function assay		1 hr	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo expressed in HEK293T cells after 1 hr by fluorescence microscopy, IC50 = 1.5 μM.	16408088
Shh Light2	Function assay		30 hrs	Activation of Shh in mouse Shh Light2 cells assessed as beta-galactosidase activity after 30 hrs by luciferase reporter gene assay in presence of 100 nM 3-keto-N-aminoethyl-N'-aminocaproyldihydrocinnamoyl cyclopamine	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo N-terminal cysteine domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
HEK293T	Function assay	5 uM	4 hrs	Inhibition of BODIPY-cyclopamine binding to Smo C-terminal cytoplasmic domain expressed in HEK293T cells at 5 uM after 4 hrs by fluorescence microscopy	16408088
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
Klicka för att visa mer experimentella data för cellinjer

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt	520.62	Formel	C₃₁H₃₂N₆O₂	Lagring (från mottagningsdatumet)	3 år-20°Cpulver
CAS-nr	483367-10-8	Ladda ner SDF		Lagring av stamlösningar	1 år-80°Ci lösningsmedel 1 månad-20°Ci lösningsmedel
Synonymer	Shh Signaling Antagonist VI			Smiles	C1CCC(CC1)N2C=NC3=C(N=C(N=C32)OC4=CC=CC5=CC=CC=C54)NC6=CC=C(C=C6)N7CCOCC7

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 4 mg/mL (7.68 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritetsräknare

Massa	Koncentration	Volym	Molekylvikt
=	×	×

Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	2%DMSO 1 30%PEG300 2 5%Tween80 3 63%ddH2O Validerad av Selleck-laboratorier. Om du behöver justeringar av denna formulering, kontakta vårt säljteam för skräddarsydd testning.	1.000mg/ml (1.92mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 20 μL of clarified DMSO stock solution of 50 mg/ml to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 630 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

Dosering: mg/kg Djurens medelvikt: g Doseringsvolym per djur:μL Antal djur:

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH₂O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened (HEK293T cells) ~1.5 μM
In vitro	Purmorphamine activates the Hedgehog pathway by directly binds and activates Smoothened with IC50 of ~ 1.5 μM in compete with cyclopamine, a Smo antagonist. This compound is a potent inducer of osteogenesis in multipotent C3H10T1/2 cells. The EC50 (based on ALP expression) for this chemical is 1 μM in C3H10T1/2 cells. It (1 μM) and BMP-4 (100 ng/mL) together increase ALP activity more than 90-fold in 3T3-L1 cells. In contrast to BMP-4, this compound induces osteogenesis by activating Hedgehog signaling in multipotent mesenchymal progenitor cells.
Kinasanalys	Binding assay
Kinasanalys	Smo-bindningsanalyser utförs med BODIPY-cyklopamin och Smo-överuttryckande celler som tidigare beskrivits4,5, med CMV-promotorbaserade, SV40-origin-innehållande expressionskonstrukter för Smo-Myc3, deletionsmutanten SmoΔCRD (deletion av aminosyror 68 till 182) och SmoΔCT (deletion av aminosyror 556 till 793). HEK 293T-celler odlas på poly-D-lysinbehandlade täckglas i 12-brunnsplattor tills 70% konfluens och transfekteras sedan med lämplig expressionskonstrukt (0,5 μg/brunn) med FuGene 6 enligt tillverkaren
In vivo	Purmorphamine up-regulates ALP expression in human mesenchymal stem cell-based constructs on rats.
Referenser	[1] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=16408088 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12465946/ [3] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=15380183 [4] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=23228449 [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32194421/

Applikationer (Applications)

Metoder	Biomarkörer	PMID
Western blot	Patch1 / Gli1 / LC3 / p62	26609469
Immunofluorescence	SOX18	26588701
Growth inhibition assay	Cell viability	26588701

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):