Home Cell Cycle ROCK Hämmare Ripasudil hydrochloride dihydrate

endast för forskning

Ripasudil hydrochloride dihydrate ROCK Hämmare

Kat.nr.: S7995

Ripasudil hydrochloride dihydrate är en potent ROCK-hämmare med IC50-värden på 51 nM respektive 19 nM för ROCK1 och ROCK2, som används för behandling av glaukom och okulär hypertension.
Ripasudil hydrochloride dihydrate ROCK Hämmare Chemical Structure

Kemisk struktur

Molekylvikt: 395.88

Hoppa till

Kvalitetskontroll (Quality Control)

Batch: S799501 Water]79 mg/mL]false]DMSO]26 mg/mL]false]Ethanol]5 mg/mL]false Renhet: 99.22%
  • Citerad i Nature Medicine för sin förstklassiga kvalitet
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datablad
99.22

Kemisk information, lagring & stabilitet (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekylvikt 395.88 Formel

C15H18FN3O2S.Cl H.2 H2 O

 Lagring (från mottagningsdatumet)
CAS-nr 887375-67-9 Ladda ner SDF Lagring av stamlösningar

Synonymer K-115 hydrochloride dihydrate Smiles CC1CNCCCN1S(=O)(=O)C2=CC=CC3=CN=CC(=C32)F.O.O.Cl

Löslighet (Solubility)

In vitro
Batch:

Water : 79 mg/mL

DMSO : 26 mg/mL (65.67 mM)
(Fuktkontaminerad DMSO kan minska lösligheten. Använd färk, vattenfri DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Molaritetsräknare

Massa Koncentration Volym Molekylvikt
Utspädningsräknare Molekylviktsräknare

In vivo
Batch:

In vivo-formuleringsräknare (Klar lösning)

Steg 1: Ange information nedan (Rekommenderas: Ett extra djur för att ta hänsyn till förluster under experimentet)

mg/kg g μL

Steg 2: Ange in vivo-formuleringen (Detta är endast räknaren, inte formuleringen. Vänligen kontakta oss först om det inte finns någon in vivo-formulering i löslighetsavsnittet.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Beräkningsresultat:

Arbetskoncentration: mg/ml;

Metod för att bereda DMSO-stamlösning: mg substans förlöst i μL DMSO ( Stamlösningskoncentration mg/mL, Vänligen kontakta oss först om koncentrationen överskrider DMSO-lösligheten för denna batch av substansen. )

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedanμL PEG300, blanda och klarna, tillsätt sedanμL Tween 80, blanda och klarna, tillsätt sedan μL ddH2O, blanda och klarna.

Metod för att bereda in vivo-formulering: Ta μL DMSO stamlösning, tillsätt sedan μL Majsolja, blanda och klarna.

Obs: 1. Se till att vätskan är klar innan du tillsätter nästa lösningsmedel.
2. Se till att tillsätta lösningsmedlet/lösningsmedlen i ordning. Du måste se till att lösningen som erhålls i föregående tillsats är en klar lösning innan du fortsätter att tillsätta nästa lösningsmedel. Fysiska metoder som vortex, ultraljud eller varmt vattenbad kan användas för att underlätta upplösningen.

Verkningsmekanism (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ROCK2
(Cell-free assay)
19 nM
ROCK1
(Cell-free assay)
51 nM
In vitro

In monkey trabecular meshwork (TM) cells, Ripasudil induces retraction and rounding of cell bodies as well as disruption of actin bundles. In Schlemm's canal endothelial (SCE) cells, Ripasudil significantly decreases transendothelial electrical resistance (TEER), increases the transendothelial flux of FITC-dextran, and disrupts cellular localization of ZO-1 expression.

Kinasanalys
Kinashämmande analys
ROCK 1 (0.75 ng/μL) och ROCK 2 (0.5 ng/μL) inkuberas med varierande koncentrationer av K-115, Y-27632 eller HA-1077 vid 25 °C i 90 minuter i 50 mmol/L Tris-HCl-buffert (pH 7.5) innehållande 100 mmol/L KCl, 10 mmol/L MgCl2, 0.1 mmol/L EGTA, 30 μmol/L Long S6 Kinase Substrate-peptid och 1 μmol/L ATP i en total volym på 40 μL. PKACα, PKC och CaMKIIα inkuberas också med varierande koncentrationer av K-115, Y-27632 eller HA-1077. PKACα (0.0625 ng/μL) inkuberas vid 25 °C i 30 minuter i 40 mmol/L Tris-HCl-buffert (pH 7.5) innehållande 20 mmol/L MgCl2, 1 mg/mL BSA, 5 μmol/L Kemptide-peptidsubstrat och 1 μmol/L ATP i en total volym på 40 μL. PKC (0.025 ng/μL) inkuberas vid 25 °C i 80 minuter i 20 mmol/L Tris-HCl-buffert (pH 7.5) innehållande 20 mmol/L MgCl2, 0.4 mmol/L CaCl2, 0.1 mg/mL BSA, 0.25 mmol/L EGTA, 25 ng/mL fosfatidylserin, 2.5 ng/mL diacylglycerol, 0.0075% Triton-X-100, 25 μmol/L DTT, 10 μmol/L Neurogranin (28–43)-peptidsubstrat och 1 μmol/L ATP i en total volym på 40 μL. CaMKIIα (0.025 ng/μL) inkuberas vid 25 °C i 90 minuter i 50 mmol/L Tris-HCl-buffert (pH 7.5) innehållande 10 mmol/L MgCl2, 2 mmol/L CaCl2, 0.04 mg/mL BSA, 16 μg/mL renat calmodulin från nötkreaturstestiklar, 500 μmol/L DTT, 50 μmol/L Autocamitide 2 och 1 μmol/L ATP i en total volym på 40 μL. Efter inkubering tillsätts 40 μL Kinase-Glo Luminescent Kinase Assay-lösning, vilket lämnas vid 25 °C i 10 minuter, och Relative Light Units (RLU) mäts med hjälp av en luminometer. RLU utan testsubstans sätts till 100 % (kontrollvärde) och RLU utan enzym och substans sätts till 0 % (normalvärde). Reaktionshastigheten (% av kontroll) beräknas därefter från RLU vid tillsats av varje koncentration av testsubstans, och 50 % hämmande koncentrationer (IC50) bestäms genom logistisk regressionsanalys med hjälp av SAS.
In vivo

In albino rabbits and monkeys, topical instillation of Ripasudil significantly reduces intraocular pressure (IOP) with maximum IOP reduction of 8.55 mmHg and 4.36 mmHg at 0.5 % and 0.4%, respectively.

Ripasudil (1 mg/kg daily, p.o.) exerts a neuroprotective effect on retinal ganglion cell (RGC) after optic nerve crush (NC) by suppressing oxidative stress through pathways involving the Nox family in a mouse model.

Referenser

Klinisk prövningsinformation (Clinical Trial Information)

(data från https://clinicaltrials.gov, uppdaterad den 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrytering Tillstånd Sponsor/Samarbetspartners Startdatum Faser
NCT04621136 Completed
Retinopathy of Prematurity
Kyushu University
 November 1 2020 Phase 1|Phase 2